Metabolic labeling and click chemistry detection of glycoprotein markers of mesenchymal stem cell differentiation.

หลักฐานจากการศึกษาในห้องปฏิบัติการและสัตว์ทดลอง เป็นรากฐานที่ช่วยให้เข้าใจกลไกและศักยภาพก่อนการศึกษาในมนุษย์ต่อไป

• ระดับ A · หลักฐานทางคลินิกค่อนข้างแข็งแรง
• ระดับ B · หลักฐานทางคลินิกที่กำลังเติบโตและมีสัญญาณเชิงบวก
• ระดับ C · งานวิจัยในมนุษย์ระยะต้นที่กำลังสำรวจประโยชน์
• ระดับ D · รากฐานทางวิทยาศาสตร์จากห้องปฏิบัติการและสัตว์ทดลอง
• กำลังศึกษาเพิ่มเติม · หัวข้อใหม่ที่นักวิจัยกำลังสำรวจอย่างต่อเนื่อง

บทคัดย่อ (ต้นฉบับภาษาอังกฤษ)

Human mesenchymal stem cells (hMSCs) are multipotent stem cells that can differentiate into a variety of cell types in vitro including osteoblasts, adipocytes, and chondrocytes. Here we apply a metabolic labeling approach to characterize changes in cellular glycoprotein expression during hMSC differentiation and to identify glycoprotein markers unique to differentiated cell types. The two-step labeling method involves the metabolic incorporation of unnatural azido-modified sugars into protein glycans and subsequent ligation with fluorescent azide-reactive detection probes utilizing the copper (I)-catalyzed cycloaddition reaction between azides and alkynes, or "click" chemistry. Metabolic labeling of cell surface O-linked or sialic acid-containing glycoproteins, or intracellular O-GlcNAc-modified proteins was accomplished by feeding cells the tetraacetylated azide-modified sugar precursors, GalNAz, ManNAz, or GlcNAz, respectively, for 48-72 h prior to harvesting the cells. The cells were then lysed, and protein extracts were reacted with a fluorescent alkyne detection probe. Labeled glycoproteins were analyzed by 1D and 2D gel electrophoresis and detected by fluorescence imaging. Our results demonstrate highly sensitive labeling of O-linked, sialic acid-containing, and O-GlcNAc modified proteins in all cell types without affecting cell growth or morphology. Selective labeling of

ระดับหลักฐาน

หลักฐานจากการศึกษาในห้องปฏิบัติการและสัตว์ทดลอง เป็นรากฐานที่ช่วยให้เข้าใจกลไกและศักยภาพก่อนการศึกษาในมนุษย์ต่อไป

ดูงานวิจัยทั้งหมดที่เกี่ยวข้อง

กรองห้องสมุดงานวิจัยด้วยชื่อเรื่อง ชื่อผู้เขียน หรือปีที่ตีพิมพ์ของงานวิจัยนี้