Facile bead-to-bead cell-transfer method for serial subculture and large-scale expansion of human mesenchymal stem cells in bioreactors

หลักฐานจากการศึกษาในห้องปฏิบัติการและสัตว์ทดลอง เป็นรากฐานที่ช่วยให้เข้าใจกลไกและศักยภาพก่อนการศึกษาในมนุษย์ต่อไป

• ระดับ A · หลักฐานทางคลินิกค่อนข้างแข็งแรง
• ระดับ B · หลักฐานทางคลินิกที่กำลังเติบโตและมีสัญญาณเชิงบวก
• ระดับ C · งานวิจัยในมนุษย์ระยะต้นที่กำลังสำรวจประโยชน์
• ระดับ D · รากฐานทางวิทยาศาสตร์จากห้องปฏิบัติการและสัตว์ทดลอง
• กำลังศึกษาเพิ่มเติม · หัวข้อใหม่ที่นักวิจัยกำลังสำรวจอย่างต่อเนื่อง

บทคัดย่อ (ต้นฉบับภาษาอังกฤษ)

The conventional planar culture of adherent cells is inefficient for large-scale manufacturing of cell and gene therapy products. We developed a facile and efficient bead-to-bead cell-transfer method for serial subculture and large-scale expansion of human mesenchymal stem cells (hMSCs) with microcarriers in bioreactors. We first compared culture medium with and without nucleosides and found the former maintained the expression of surface markers of hMSCs during their prolonged culture and enabled faster cell proliferation. Subsequently, we developed our bead-to-bead cell transfer method to subculture hMSCs and found that intermittent agitation after adding fresh microcarriers to cell-populated microcarriers could promote spontaneous cell migration to fresh microcarriers, reduce microcarrier aggregation, and improve cell yield. This method enabled serial subculture of hMSCs in spinner flasks from passage 4 to passage 9 without using proteolytic enzymes, which showed faster cell proliferation than the serial planar cultures undergoing multiple enzyme treatment. Finally, we used the medium containing nucleosides and our bead-to-bead cell transfer method for cell culture scale-up from 4- to 50-L cultures in single-use bioreactors. We achieved a 242-fold increase in the number of cells to 1.45 × 10 10 after 27-day culture and found that the cells harvested from the bioreactors main

ระดับหลักฐาน

หลักฐานจากการศึกษาในห้องปฏิบัติการและสัตว์ทดลอง เป็นรากฐานที่ช่วยให้เข้าใจกลไกและศักยภาพก่อนการศึกษาในมนุษย์ต่อไป

ดูงานวิจัยทั้งหมดที่เกี่ยวข้อง

กรองห้องสมุดงานวิจัยด้วยชื่อเรื่อง ชื่อผู้เขียน หรือปีที่ตีพิมพ์ของงานวิจัยนี้