Generation of a Bioengineered Substitute of the Human Sclero-Corneal Limbus Using a Novel Decellularization Method

หลักฐานจากการศึกษาในห้องปฏิบัติการและสัตว์ทดลอง เป็นรากฐานที่ช่วยให้เข้าใจกลไกและศักยภาพก่อนการศึกษาในมนุษย์ต่อไป

• ระดับ A · หลักฐานทางคลินิกค่อนข้างแข็งแรง
• ระดับ B · หลักฐานทางคลินิกที่กำลังเติบโตและมีสัญญาณเชิงบวก
• ระดับ C · งานวิจัยในมนุษย์ระยะต้นที่กำลังสำรวจประโยชน์
• ระดับ D · รากฐานทางวิทยาศาสตร์จากห้องปฏิบัติการและสัตว์ทดลอง
• กำลังศึกษาเพิ่มเติม · หัวข้อใหม่ที่นักวิจัยกำลังสำรวจอย่างต่อเนื่อง

บทคัดย่อ (ต้นฉบับภาษาอังกฤษ)

Background : Severe dysfunction of the human limbus associated with limbal stem cell deficiency is a therapeutic challenge, especially when a structural alteration of the limbal niche is associated. Methods: We have evaluated seven decellularization protocols applied to 20 human sclero-corneal limbus, based on the use of SDS (protocol P1), SDS + NaCl (P2), SDS + triton X-100 + SDC + enzymatic treatment (P3), SDS + triton X-100 + SDC + enzymatic treatment + trypsin (P4), sulfobetains + DNAse (P5), sulfobetains + SDC + DNAse (P6) and SDC + DNAse (P7). The decellularization efficiency of each protocol, biocompatibility and safety, as well as their capability to support cell attachment and differentiation, were evaluated. Results: Results showed that the use of protocols P1 to P4, based on strong ionic detergents such as SDS, was not efficient for decellularizing the human limbus. Conversely, protocols P5, P6 and P7 removed more than 95% of DNA while preserving 60-100% of the extracellular matrix components. These protocols were biocompatible, as macrophages cultured with decellularized scaffolds were viable and differentiated to the pro-regenerative M2 phenotype (CD163/CD86 ratio > 2) without inducing a significant increase in reactive oxygen species (ROS). Protocols P6 and P7 supported cell attachment, survival and differentiation of corneal epithelial cells and four types of mes

ระดับหลักฐาน

หลักฐานจากการศึกษาในห้องปฏิบัติการและสัตว์ทดลอง เป็นรากฐานที่ช่วยให้เข้าใจกลไกและศักยภาพก่อนการศึกษาในมนุษย์ต่อไป

ดูงานวิจัยทั้งหมดที่เกี่ยวข้อง

กรองห้องสมุดงานวิจัยด้วยชื่อเรื่อง ชื่อผู้เขียน หรือปีที่ตีพิมพ์ของงานวิจัยนี้